PCR操作范例及反应体系的组成一、PCR操作范例在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2和两个合成的DNA引物。模板DNa94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各成份的组成，加入量和反应条件，使人们以此为基础，对不同的研究对象逐项改变来找到反应条...

三种蛋白测定方法与标准曲线拟合一、蛋白浓度测定的常见方法1、考马斯亮蓝G250法测定蛋白浓度（bradford法）1）实验原理考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。考马斯亮蓝G－250存在着两种不同的颜色形式，红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合，在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律（Beer’slaw）。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和蓝色形式，zui大光吸收由465nm变成595nm，通过...

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验实验步骤一、取得小鼠胚胎1.性成熟母小鼠与种公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合笼。2.每天早上观察母小鼠口。有乳白色或蛋黄色冻胶状物(栓)即确定为怀孕。见栓当天上午定为怀孕的0.5d。3.取怀孕12.5～14.5d母鼠，断颈处死，无菌条件下暴露子宫。4.用镊子提起近子宫颈端，分离子宫系膜，剪断子宫角。5.取出整个子宫，置于有PBS的平皿内。用PBS洗涤三次，弃除表面残余血迹。6.沿子宫系膜侧剪开子宫，取出带有胎膜的胚胎，置于另一盛有PB...

如何确定ELISA试剂盒购买数量？购买某种试剂盒的数量可以大体按照下述公式计算：X（盒）=处理数×重复次数÷单个试剂盒能够测定样品的次数。但是，因为测定中操作失误，或者对某些样品测定结果有怀疑，需要补测，所以实际购买时总是应该从宽计算，通常可以在计算值基础上加一个试剂盒，免得要重新购买试剂盒，耽误时间。另外，钰博生物不建议一次购买大量同种试剂盒，因为（1）万一试剂盒质量有问题，不至于造成太大损失；（2）防止储存过久造成试剂盒失效；（3）防止因为样品质量问题，造成测定结果不可靠...

别为了变强壮而忽略了你的心脏！研究人员称，长期使用合成代谢类固醇来增强肌肉可能会给心脏带来负面影响。大量服用此类药物的健身爱好者需要引起注意：有研究表明，长期使用合成代谢类固醇会使心脏正常功能受损，这类药物液会造成动脉血管阻塞。哈佛医学院精神病学教授，也是这项研究的合着者HarrisonPopeJr.博士表示：“意识到长期使用合成代谢类固醇会给心脏带来的风险，这对临床医生至关重要。”合成代谢类固醇类似于合成的雄性性激素。研究人员称，据估计有290万到400万的美国人曾服用过合...

培养皿的分类及注意事项培养皿的分类1.根据培养皿用途的不同可分为细胞培养皿和细菌培养皿。2.根据制造材料的不同分为塑料培养皿和玻璃培养皿，但进口培养皿和一次性培养皿大都是塑料材料。3.根据大小的不同通常可分为直径为35mm，60mm，90mm。150mm培养皿。4.根据分隔的不同又可分为2分隔培养皿，3分隔培养皿等。5.培养皿材质基本上分为两类，主要为塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用...

实验室常用贮存液的配制参数1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1gN，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些...

免疫酶技术的优势ELISA试剂盒免疫酶技术是什么？免疫酶技术就是用酶(如辣根过氧化物酶)标记已知抗体(或抗原)，然后与组织标本在一定条件下反应，如果组织中含有相应抗原(或抗体)，抗原抗体相互结合形成的复合物中所带酶分子遇到底物时，能催化底物水解、氧化或还原，产生显色反应，这样就可以识别出标本抗原(抗体)分布的位置和性质，通过图像分析并可达到定量的目的。ELISA试剂盒免疫酶技术与免疫荧光技术免疫荧光技术虽已广泛应用于免疫学的研究与诊断，但是荧光抗体染色标本不能长期保存，对组织...