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技术文章/ Technical Articles

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  • 细胞冻存的方法

    细胞冻存的方法细胞冻存的方法:1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。3.冻存液:先用培养液9分+DMSO1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察...

    2017-08-15查看详情
  • 黑胶虫抑制剂使用方法

    黑胶虫抑制剂使用方法黑胶虫污染发生的非常普遍。以下是某个同学的实验室同黑胶虫战斗的经验:1.黑胶虫是一种黑色,近乎实心,贴在细胞上的是不动的,游离的是在原地旋转或者震动,它几乎不能运动到其身体2倍距离以外。2.黑胶虫的来源不确定是否是血清,但是0.22微米过滤并不能除去黑胶虫。3.黑胶虫污染可以在细胞培养箱内传播,尤其是相邻的培养皿之间。4.黑胶虫污染可以通过规范的细胞培养操作和加双抗预防,只要做好这两点,应该*可以避免黑胶虫的污染。5.另外如果细胞生长速度较快,黑胶虫的生长...

    2017-08-04查看详情
  • 新型疫苗能够提高流感治疗性

    新型疫苗能够提高流感治疗性zui近一项研究开发出了新型的抵抗季节性流感的疫苗,这一技术或许能够加快起效的速率以及为流感病毒感染提供更好的保护。几十年来,疫苗生产者们利用鸡蛋生产流感病毒毒株用于疫苗接种。然而,由于人类流感疫苗变异速率过快,因此生产的疫苗难以满足实际的需求,保护效果也不佳。对此,来自杜克大学的研究者们开发出了一种方法,能够让人类流感病毒在生增殖过程中不发生变异,从而使得生产出的疫苗能够在较短的时间范围内对靶标产生较高的亲和力。相关结果发表在《mBio》杂志上。“...

    2017-07-27查看详情
  • PCR操作范例及反应体系的组成

    PCR操作范例及反应体系的组成一、PCR操作范例在一个典型的PCR反应体系中需加入:适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2和两个合成的DNA引物。模板DNa94℃变性1min,引物与模板40~60℃退火1min,72℃延伸2min。在循环前模板预变性3~5min;在末次循环后,样品仍需继续延伸3~5min以上,确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各成份的组成,加入量和反应条件,使人们以此为基础,对不同的研究对象逐项改变来找到反应条...

    2017-07-18查看详情
  • 三种蛋白测定方法与标准曲线拟合

    三种蛋白测定方法与标准曲线拟合一、蛋白浓度测定的常见方法1、考马斯亮蓝G250法测定蛋白浓度(bradford法)1)实验原理考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。考马斯亮蓝G-250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer’slaw)。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和蓝色形式,zui大光吸收由465nm变成595nm,通过...

    2017-07-07查看详情
  • 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验

    小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验实验步骤一、取得小鼠胚胎1.性成熟母小鼠与种公鼠按1公(♂):2母(♀)比例合笼。2.每天早上观察母小鼠口。有乳白色或蛋黄色冻胶状物(栓)即确定为怀孕。见栓当天上午定为怀孕的0.5d。3.取怀孕12.5~14.5d母鼠,断颈处死,无菌条件下暴露子宫。4.用镊子提起近子宫颈端,分离子宫系膜,剪断子宫角。5.取出整个子宫,置于有PBS的平皿内。用PBS洗涤三次,弃除表面残余血迹。6.沿子宫系膜侧剪开子宫,取出带有胎膜的胚胎,置于另一盛有PB...

    2017-06-23查看详情
  • 如何确定ELISA试剂盒购买数量?

    如何确定ELISA试剂盒购买数量?购买某种试剂盒的数量可以大体按照下述公式计算:X(盒)=处理数×重复次数÷单个试剂盒能够测定样品的次数。但是,因为测定中操作失误,或者对某些样品测定结果有怀疑,需要补测,所以实际购买时总是应该从宽计算,通常可以在计算值基础上加一个试剂盒,免得要重新购买试剂盒,耽误时间。另外,钰博生物不建议一次购买大量同种试剂盒,因为(1)万一试剂盒质量有问题,不至于造成太大损失;(2)防止储存过久造成试剂盒失效;(3)防止因为样品质量问题,造成测定结果不可靠...

    2017-06-06查看详情
  • 别为了变强壮而忽略了你的心脏!

    别为了变强壮而忽略了你的心脏!研究人员称,长期使用合成代谢类固醇来增强肌肉可能会给心脏带来负面影响。大量服用此类药物的健身爱好者需要引起注意:有研究表明,长期使用合成代谢类固醇会使心脏正常功能受损,这类药物液会造成动脉血管阻塞。哈佛医学院精神病学教授,也是这项研究的合着者HarrisonPopeJr.博士表示:“意识到长期使用合成代谢类固醇会给心脏带来的风险,这对临床医生至关重要。”合成代谢类固醇类似于合成的雄性性激素。研究人员称,据估计有290万到400万的美国人曾服用过合...

    2017-05-27查看详情
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